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原位杂交是一种重要的实时定量PCR检测方法

更新时间:2023-02-25 点击量:651
   原位杂交是一种重要的生物技术手段,主要利用DNA双链分子和特异性Probe分子建立原位杂交反应,当Probe分子靠近DNA双链时,Probe分子上的特异性引物将在DNA双链上的特异序列处引发双链链接,从而形成一个叫做杂交的物料,然后利用特异的标记物及检测仪器,反映其存在与否及定量内容。
 
  原位杂交是利用原位杂交仪将特异性的核酸直接定量地检测到实时荧光发射,从而将基因表达水平空间化地进行定量检测,集成了变性/杂交、杂交、多步运行三种操作模式,适用于各种原位杂交实验,是一种重要的实时定量PCR检测方法。
 
  仪器特点:
 
  (1)敏感性高:非特异性污染非常低,可以检测非常少量的mRNA、DNA等物质,具有很强的敏感性。
 
  (2)灵敏度高:由于具有单一分子灵敏度,比传统的定量PCR方法更加灵敏,可以快速检测微量物质的变化情况。
 
  (3)节省时间:与传统的PCR定量方法相比,原位杂交仪不需要建立分子生物学实验,只需在准备好的装置上放置样品和Probe,就可以节省大量的实验时间。
 
  (4)精确度高:可以精确地测量和检测具有特异性标记或Probe物质的变化,可以更准确地定量和计算细胞内的mRNA和DNA含量,确保定量结果的准确性。
 
  (5)高通量:在同一仪器上可以对多种不同的环境或细胞样品进行同步检测,实现大量样品、少量试验、快速实验,从而实现了高通量检测和实验效率。
 
  原位杂交仪作为一种重要的定量PCR方法,已深受临床、医学和生物学研究领域的青睐,在基因组学、药物研发、新药筛选等领域中得到广泛应用。它不仅可以对基因表达水平进行定量检测,而且可以检测少量物质的变化情况,更能够精确地测量和计算DNA和mRNA的含量,具有非常重要的临床研究价值。